Антитяло-зависимата клетъчна цитотоксичност (ADCC) е основният механизъм на действие за няколко предлагани на пазара терапевтични антитела (mAbs) и за много други включени в клинични изпитвания. Ефикасността на ADCC силно зависи от способността на терапевтичните mAbs да набират ефекторни клетки като естествени клетки убийци, които индуцират апоптозата на целевите клетки. Набирането на ефекторни клетки от mAbs се влияе отрицателно от модификация на фукоза на N-гликани върху Fc; по този начин, използването на афукозилиран mAbs е тенденция за подобрена ADCC терапия. Повечето афукозилирани mAbs в клинично или търговско производство са произведени от клетки гостоприемници на клетки от яйчници на китайски хамстер (CHO), като обикновено генерират ниски добиви в сравнение с дивизионен тип гостоприемник. Изследването описва подробно създаването и характеризирането на две модифицирани CHOZN® клетъчни линии, в които ензимът, участващ в синтеза на гуанозин дифосфат (GDP) -фукоза, GDP маноза-4,6-дехидратаза (Gmds) и GDP-L-фукоза синтаза (FX) ), е елиминиран. Най-добрите клетъчни линии на гостоприемника за всеки от нокаутите, FX – / – и Gmds – / -, са избрани въз основа на устойчивостта на растежа, избирателния толеранс към количеството MSX, производствения титър, нивото на фукозилиране и клетъчната стабилност. Тествано е производството на две патентовани IgG1 mAbs в модифицирани клетки гостоприемници и е установено, че титрите са сравними с клетките CHOZN®. MAbs, генерирани от която и да е от клетъчна линия на KO, показват липса на модификация на фукоза, което води до значително подсилени FcγRIIIa и ADCC ефекти. Тези данни демонстрират, че и двата вида клетки гостоприемници FX – / – и Gmds – / – могат да заменят клетки Fut8 – / – CHO за клинично производство на терапевтични антитела. Повече информация може да получите тук.
471